5α-reductasa y conversión a allopregnanolona: variabilidad individual y consecuencias neurológicas

Proyecto: L7-2
Etapa: REPORT_ES
Fecha de corte: 2026-07-31
Clasificación: metabolómica de progesterona, neuroesteroides y neurobiología femenina
Población núcleo: mujeres de 35–55 años durante la transición reproductiva tardía–perimenopausia
Naturaleza: informe científico de investigación; no es consejo médico, diagnóstico, prescripción ni evaluación de un caso individual.

1. Resumen científico ejecutivo

La 5α-reductasa inicia la conversión de progesterona (P4) a 5α-dihidroprogesterona (5α-DHP); un segundo paso 3α produce allopregnanolona (Allo), modulador alostérico positivo de receptores GABA_A. Esa bioquímica es real, pero la explicación común —«menos 5α-reductasa produce menos Allo y por ello peor función cerebral»— no está demostrada en mujeres. No existe una medición humana longitudinal del flujo cerebral P4→5α-DHP→Allo, ni un puente cuantitativo validado sangre–LCR/cerebro en mujeres de 35–55 años. Una concentración o una razón sérica integra sustrato, fuente, formación, transporte, conjugación y depuración; no identifica actividad enzimática ni inhibición neural.

La evidencia humana más informativa favorece dos filtros seriales. El primero es metabólico: disponibilidad y trayectoria de P4, reducción 5α, partición 3α/back-oxidación/epimerización, transporte y eliminación determinan exposición local a Allo e isoallopregnanolona (ISO). El segundo es neural: composición, ensamblaje, superficie, fosforilación y gradiente de cloruro determinan cómo GABA_A convierte esa exposición en función. En PMDD, estudios controlados no encuentran una gran separación periférica promedio de Allo, mientras supresión/addback, TMS, MRS y retos farmacológicos muestran sensibilidad dependiente de fase y circuito. Dutasterida demuestra que la vía 5α es perturbable, no que Allo cerebral sea la única molécula causal. El ensayo multicéntrico mayor de sepranolona no alcanzó su desenlace principal predefinido.

La hipótesis primaria revisada es un desajuste trayectoria–adaptación: a pico y AUC de Allo iguales, una trayectoria rápida o irregular puede producir una función distinta si el receptor se adapta en escalas temporales diferentes. Esta hipótesis sólo es interpretable si E_GABA es hiperpolarizante y estable; de otro modo, maduración incompleta de neuronas, KCC2/NKCC1 o la configuración electrofisiológica pueden simular histéresis. La hipótesis competidora que mejor explica los datos humanos actuales es sistémica/metrológica: fase, P4, fuente, farmacocinética, selección y matriz explican o vuelven no identificable la señal periférica, sin demostrar que el efecto central sea nulo. La hipótesis traslacional —un fenotipo mínimo con una medida de exposición y otra de respuesta— permanece aparcada hasta demostrar causalidad, concordancia de compartimento, confiabilidad y ganancia externa.

La conexión con longevidad femenina permanece abierta, no establecida. Allo cortical baja en Alzheimer es una asociación post mortem compatible con pérdida secundaria o redistribución. La preclínica muestra signos distintos para exposición aguda/intermitente y continua, además de dependencia por edad, modelo y sexo. El único puente defendible hacia salud cerebral es prospectivo: mecanismo causal → exposición central validada → función proximal específica → trayectoria multianual → años libres de enfermedad. Ninguna fuente disponible completa esa cadena.

Delta científico concreto de REPORT_ES: la síntesis final reemplaza la narrativa de deficiencia uniforme por un modelo identificable de metabolismo local × trayectoria de exposición × adaptación receptora × homeostasis de cloruro; establece que el primer experimento decisivo es assay-first y que ningún puente a salud cerebral, Pharma o longevidad debe abrirse sin separar estereoquímica, flujo, compartimento y signo funcional de GABA_A.

2. Pregunta científica y relevancia

La pregunta exacta es:

En mujeres adultas expuestas a cambios endógenos de P4, especialmente durante la transición reproductiva tardía–perimenopausia, ¿existe variabilidad reproducible del flujo P4→5α-DHP→Allo que modifique una función GABA_A proximal, o la heterogeneidad neurológica se explica mejor por arquitectura ovulatoria, fuente/depuración, metabolismo downstream, estereoquímica, trayectoria hormonal y adaptación receptora?

La relevancia para salud femenina proviene de una coincidencia temporal: antes de la menopausia definitiva aumentan la anovulación, la variabilidad de fase lútea y la irregularidad de P4. Esto puede cambiar no sólo la cantidad de sustrato, sino la pendiente, duración y frecuencia de exposición neuroesteroidea. Sueño, respuesta al estrés, afecto, cognición aguda y umbral convulsivo son funciones próximas plausibles, pero no intercambiables. El interés para longevidad consiste en saber si ventanas repetidas de disfunción dejan una trayectoria persistente de vulnerabilidad cerebral; actualmente eso es una hipótesis, no una conclusión.

Seis eslabones deben identificarse por separado:

1. Sustrato: P4 biodisponible y su trayectoria temporal.
2. Flujo: fracción que pasa por 5α y luego por 3α.
3. Fuente/compartimento: periferia, síntesis neural local, entrada y salida.
4. Destino: Allo, ISO, productos 5β/20α, conjugados y back-oxidación.
5. Respuesta: ensamblaje GABA_A, cloruro, estado de red e historia de exposición.
6. Trayectoria de salud: función proximal, persistencia multianual y desenlace clínico separado.

3. Alcance, población y etapa vital

La población primaria son mujeres no embarazadas de aproximadamente 35–55 años, seguidas dentro de persona desde etapa reproductiva tardía hasta perimenopausia temprana y tardía. La etapa debe definirse mediante historia menstrual repetida y criterios STRAW+10; la ovulación requiere un método ortogonal y no puede definirse sólo por P4. Edad cronológica no equivale a perimenopausia.

Estratos obligatorios:

• ciclos ovulatorios en etapa reproductiva tardía;
• perimenopausia temprana con ovulación documentada;
• perimenopausia tardía, separando ciclos ovulatorios y anovulatorios;
• postmenopausia natural como frontera de baja producción ovárica, no como sustituto de transición;
• fases folicular, periovulatoria, lútea temprana/media/tardía y retirada;
• exposición hormonal ascendente, meseta, oscilatoria y retirada;
• uso de hormonas o fármacos, función hepática/renal, E2, sueño, HPA, temperatura y medicación como fuentes o modificadores preespecificados.

PMDD, PTSD, embarazo/puerperio y Alzheimer se usan como perturbaciones mecanísticas separadas. No se fusionan porque difieren en magnitud hormonal, placenta, patología, edad, selección y circuito. Los modelos iPSC, cocultivos y organoides prueban mecanismos humanos generales; la reprogramación puede borrar edad e historia endocrina y no modela por sí sola la perimenopausia adquirida.

Fuera de alcance: prescripción, consejo individual, evaluación comparativa de tratamientos, propuestas de producto o marketing, uso de datos actuales de Lua, y cualquier inferencia directa de síntomas o un diagnóstico hacia longevidad.

4. Conocimiento base y mapa del mecanismo

4.1 Ruta metabólica

ovulación/arquitectura lútea + fuentes periféricas/neuronales
        ↓
P4 disponible(t)
        ↓  SRD5A1/2 + NADPH
5α-DHP(t)
        ├── reducción 3α → Allo (3α,5α) → modulación positiva GABA_A
        ├── reducción 3β → ISO (3β,5α) → amortiguación funcional de Allo
        ├── back-oxidación → 5α-DHP
        └── productos 20α/conjugados/salida

En tejido temporal humano de cirugía por epilepsia se demostró capacidad local 5α/3α con un sustrato androgénico; SRD5A1 fue detectable y SRD5A2 no en ese tejido. Esto apoya capacidad regional, no flujo de P4 in vivo ni dominancia universal de una isoforma. El paso downstream es reversible y dependiente de enzima, cofactor y compartimento. La bioquímica recombinante favorece AKR1C2 como control positivo de formación de Allo; AKR1C3/HSD17B6 son candidatos localizados por RNA, no efectores demostrados. HSD17B10 puede oxidar Allo, pero sus funciones mitocondriales esenciales invalidan un knockout simple como prueba específica.

La concentración local puede representarse como:

[ C_{Allo}(t)=formación\ local+entrada-back\text{-}oxidación-epimerización-conjugación-salida. ]

Por ello, Allo/P4 o Allo/5α-DHP no son actividad enzimática. Un cuello 5α predice disminución conjunta de 5α-DHP y Allo; un cuello posterior predice 5α-DHP preservada o acumulada con Allo menor; un defecto de transporte puede cambiar medio/plasma sin cambiar formación intracelular.

4.2 Filtro receptor y cloruro

Allo modula receptores pentaméricos GABA_A. Configuraciones extrasinápticas con subunidad δ suelen sostener inhibición tónica y mostrar alta sensibilidad a neuroesteroides; receptores con γ2 contribuyen a señal fásica. Sin embargo, RNA de GABRA4/GABRD/GABRG2 no prueba coexpresión, subunidad β asociada, ensamblaje, superficie o corriente.

El efecto funcional depende de la fuerza impulsora de cloruro. Una corriente GABA_A no equivale automáticamente a inhibición: si E_GABA es despolarizante por inmadurez, relación NKCC1/KCC2 o condiciones de registro, aumentar conductancia puede no reducir excitabilidad. Además, Allo puede producir modulación rápida y cambios sostenidos de fosforilación/tráfico dependientes de PKC. No existe razón para asumir una sola escala de adaptación.

4.3 Modelo dinámico

Sea E(t) la exposición neuroesteroidea efectiva —Allo libre, ISO, GABA ambiental y distribución— y R(t) el estado receptor —ensamblaje, superficie, fosforilación y cloruro—. La función es:

[ I(t)=F[E(t),R(t),E_{GABA},circuito]. ]

El desajuste aparece cuando E(t) cambia en una escala más rápida que una o más adaptaciones de R(t). Esta formulación genera una predicción fuerte: con Allo libre, pico, AUC y tiempo sobre umbral iguales, trayectorias temporales distintas pueden producir diferente ganancia inhibitoria; el efecto debe ser precedido por una lectura receptora independiente y no explicado por E_GABA, Allo residual o GABA ambiental.

4.4 Puente a salud cerebral

El puente propuesto, todavía inferido, es:

ventanas repetidas de desajuste → alteración específica de sueño/excitabilidad/estrés → recuperación incompleta en el mismo dominio → trayectoria funcional.

No se permite saltar de sedación, ánimo, TMS, MRS o Alzheimer post mortem a healthspan o longevidad. La recuperación entre ventanas puede borrar, amortiguar o invertir cualquier carga acumulada.

5. Método de evidencia

Este informe integra los artefactos verificados de SCOPING, EVIDENCE_MAP, EVIDENCE_VERIFICATION, MECHANISTIC_SYNTHESIS, COMPUTE_DECISION, COMPUTE_OPTIONAL, HYPOTHESIS_GENERATION, ADVERSARIAL_REVIEW y EXPERIMENT_DESIGN. Las afirmaciones decisivas se contrastaron con artículos primarios, PubMed/PMC, DOI editorial y registros de ensayos. La búsqueda reciente fue dirigida por capacidad de cambiar hipótesis: PMDD 2024–2025, maduración GABA en iPSC, catálisis de AKR1C2, pleiotropía de HSD17B10 y metrología estereoespecífica.

Reglas aplicadas:

• distinguir evidencia humana, animal, in vitro/ex vivo, computacional e inferida;
• no convertir ausencia de significación en equivalencia;
• preservar desenlaces predefinidos frente a señales post hoc;
• mantener sangre, LCR, tejido, PBMC, TMS, MRS y fMRI como lecturas distintas;
• no adjudicar Allo específica a una intervención que altera varios esteroides;
• no llamar flujo a concentración, razón, RNA o proteína;
• no extrapolar PMDD/puerperio/animal a perimenopausia sin validación;
• no llamar longevidad a un síntoma, órgano, diagnóstico o seguimiento corto.

Escala de madurez: H0 idea mecanística; H1 enlaces apoyados por literatura; H2 señal computacional/dataset; H3 réplica observacional; H4 validación experimental/preclínica; H5 elegibilidad para evaluación de partnering con revisión humana. Ninguna hipótesis integrada de L7-2 supera H0; algunos enlaces alcanzan H1 y la localización transcriptómica alcanza H2 descriptivo.

6. Mapa de evidencia

En conjunto, ninguna fuente alcanza confianza alta para la cadena completa. La evidencia más fuerte se refiere a capacidad bioquímica y perturbabilidad; los eslabones de variabilidad individual central, causalidad funcional y longevidad siguen sin identificación.

7. Evidencia contradictoria y resultados nulos

1. Allo periférica similar, pero la vía es perturbable. PHASE y supresión/addback no muestran gran diferencia promedio de Allo en PMDD; dutasterida reduce oscilación y síntomas en una muestra pequeña. Explicaciones: dinámica de varios esteroides 5α, subgrupo central, sensibilidad receptora o falso positivo. Menor discriminante: trazador/bypass y un endpoint funcional proximal.

2. Función por fase, pero no en todos los circuitos. MRS/TMS sugieren adaptación; Allo IV conservó sedación en ambos grupos y sobresalto/PPI fue nulo; un estudio mayor de sobresalto también fue nulo. Esto restringe el mecanismo a circuito, dosis y ventana.

3. Sepranolona inicial positiva, ensayo mayor principal negativo. El ensayo de 2021 no separó tratamiento de placebo en el desenlace primario salvo una señal limitada; los resultados favorables fueron post hoc, per-protocol, de ciclo 3 y a 10 mg, no a 16 mg. No valida una farmacología simple ISO/Allo.

4. Menopausia y compartimento. Un estudio GC/MS encontró Allo sérica absoluta menor después de menopausia, pero una razón Allo/P4 indistinguible de la fase folicular; un estudio RIA anterior no halló descenso sérico simple. El cerebro post mortem mostró niveles menores, pero con n=10, edad y causa de muerte confusas. Método, fuente y compartimento sobreviven como explicaciones.

5. Allo puede potenciar o reducir una corriente. En receptores α4β2δ recombinantes, el efecto depende de polaridad, concentración, desensibilización y PKC. Esto no niega la modulación positiva general, pero destruye la equivalencia «más corriente = más inhibición».

6. RNA y catálisis discrepan. El atlas favorece detectabilidad de AKR1C3/HSD17B6; la bioquímica recombinante demuestra formación directa con AKR1C2 y actividad débil/no demostrada de otros candidatos en el sustrato relevante. La localización no ordena catálisis.

7. Allo y envejecimiento no muestran un signo uniforme. Allo cortical baja se asocia con AD, pero exposición continua empeoró algunos modelos amiloides y exposición aguda/intermitente benefició otros contextos. Causalidad inversa, régimen, edad, genotipo y sexo deben competir.

8. Nulo epistémico no es nulo biológico. La señal sanguínea actual puede desaparecer por fase, PK y error de medida aun si existe una diferencia cerebral real. Sólo una exposición central validada y una función fiable podrían sostener equivalencia biológica.

8. Síntesis multiescala del mecanismo

8.1 Molecular/celular

SRD5A1 es la isoforma inicial más defendible para un sistema cerebral adulto. El paso downstream debe resolverse con producto marcado: AKR1C2 como control formador; AKR1C1/3, HSD17B6 y un SDR como rivales de partición; HSD17B10 sólo con separación de función. El balance Allo/ISO puede cambiar el signo funcional a carga 5α total similar, pero la enzima dominante y su relevancia humana no están establecidas.

La distribución transcriptómica sugiere dos arquitecturas rivales: suficiencia intraneuronal o microcircuito astrocito–neurona. El cocultivo sólo contará como microcircuito si cambia el balance de masa y una pérdida–rescate localiza el efecto; un cambio del sobrenadante puede ser transporte o adsorción.

8.2 Receptor/red

El receptor es un filtro adaptable y multiescala. Allo puede modular el canal inmediatamente y, en horas, cambiar fosforilación, tráfico y superficie. La respuesta depende de E_GABA, KCC2/NKCC1, GABA ambiental, subunidades β, relación E/I y circuito. Una preparación neural inmadura puede fabricar un resultado paradójico sin modelar ninguna vulnerabilidad femenina.

8.3 Sistema/etapa vital

En la perimenopausia, la predicción central no es una caída monotónica de Allo, sino una mayor irregularidad de P4(t) y de la exposición downstream. Ciclos ovulatorios, anovulatorios y retiradas deben analizarse separadamente. HPA, E2 y sueño pueden ser confundidores, mediadores o rutas paralelas; el DAG temporal debe decidir su papel antes del análisis, no después del resultado.

8.4 Trayectoria de salud

Si las ventanas alteran repetidamente una función, deben preceder el cambio, superar función basal y mostrar recuperación incompleta. Una suma de ventanas no es válida por defecto: adaptación y recuperación pueden volver el efecto no aditivo. Healthspan requiere persistencia multianual y desenlaces órgano-específicos; longevidad exige años libres de enfermedad y competing risks. L7-2 no dispone de esa evidencia.

9. Capa computacional

Se usó CELLxGENE Census 2025-11-08 con Python 3.12.13, cellxgene-census 1.18.0 y tiledbsoma 1.17.1. El filtro incluyó tejido cerebral primario, sexo femenino, enfermedad normal y edades 35–55 cuando estaban disponibles. La matriz final contenía 317,097 células/núcleos, 24 datasets y 48 pares dataset×donante; las edades observadas fueron 36–38, 40–45 y 48–55. No se hicieron contrastes de etapa.

La unidad pseudobulk fue dataset×donante×región×clase, con sensibilidades de ≥50, ≥100 y ≥200 células. SRD5A1 fue robusto en las clases principales; SRD5A2 no superó el gate conservador. AKR1C3 y HSD17B6 fueron accionables en neuronas/astrocitos; AKR1C4 no tuvo unidad detectable. En neuronas, al corte ≥100, GABRA4, GABRD y GABRG2 mostraron fracciones positivas medianas de 79.1%, 40.2% y 87.4%.

Interpretación: se prioriza SRD5A1, se compara neurona con cocultivo astrocito–neurona y se conserva AKR1C3/HSD17B6 como candidatos de localización. La capa no demuestra proteína, coexpresión, catálisis, dirección redox, Allo/ISO, GABA_A, etapa vital ni longevidad. La réplica SEA-AD no se ejecutó por cambio de versión y tamaño del objeto; no se fabricó una réplica externa.

10. Hipótesis primaria: L7-2-AR-H1 v2

Rol: hipótesis mecanística principal estrecha.
Estado: weakened_narrowed.
Confianza: 0.30.
Madurez: H0 integrada; H1 para los enlaces generales trayectoria/plasticidad.

Enunciado falseable: en neuronas humanas con GABA hiperpolarizante demostrado, E_GABA, Allo libre, GABA ambiental y metabolismo esteroideo estables, trayectorias de Allo con pico/AUC iguales modificarán la ganancia inhibitoria sólo si inducen un cambio de receptor/tráfico medido independientemente; el patrón debe predecir una trayectoria retenida y no poder explicarse por cloruro o concentración residual.

Mecanismo: exposición rápida/irregular → fosforilación y recambio de receptores en escalas distintas → desajuste transitorio entre conductancia esperada y ganancia inhibitoria → cambio de excitabilidad específica de circuito.

Predicciones:

1. E_GABA permanecerá dentro de ±5 mV del basal durante los contrastes.
2. Una estimación de fosforilación/superficie, obtenida en placas independientes, predecirá la trayectoria de mayor efecto antes de abrir la electrofisiología.
3. El orden temporal será receptor → ganancia inhibitoria → excitabilidad.
4. Una waveform oscilatoria retenida replicará sin reajustar escalas temporales.
5. Igualar Allo/ISO y bloquear un efector metabólico validado no borrará la interacción trayectoria×receptor.

Evidencia a favor: manipulación endocrina humana, MRS/TMS por fase, farmacología contextual y causalidad animal δ/α4.
Evidencia contra: nulos por circuito, sepranolona principal negativa, falta de manipulación humana aislada, maduración/cloruro y ausencia de cohorte perimenopáusica central.

Kill criteria: equivalencia entre trayectorias en dos fondos y réplica; fallo de predicción retenida; efecto explicado por E_GABA, Allo residual, ISO, GABA, temperatura, viabilidad o composición de red; cambio receptor sin cambio funcional material; o necesidad de reajustar una escala distinta para cada trayectoria.

Menor discriminante: Q1→D0C, descrito en la sección 14.

11. Hipótesis competidora: L7-2-AR-H3 v2

Rol: competidora sistémica/metrológica que mejor explica la evidencia humana existente.
Estado: strengthened_for_existing_human_data.
Confianza: 0.62 para la nulidad epistémica; 0.20 para equivalencia biológica.
Madurez: H1 epistémica; H0 causal.

Enunciado falseable: en asociaciones humanas basadas en sangre, la señal atribuida a 5AR/Allo será explicada o quedará no identificable al modelar fase, P4, fuente, PK, método y selección; esto no implica equivalencia central. Sólo se aceptará una nulidad biológica si una exposición neural validada y una función proximal fiable no añaden un efecto material.

Mecanismo rival: arquitectura ovulatoria/energética y etapa determinan P4/Allo periféricas; E2, HPA, sueño, inflamación y salud basal cambian en paralelo la función neural; método, matriz, depuración y muestreo añaden error.

Predicciones:

1. Cocientes periféricos mostrarán repetibilidad baja y sensibilidad a fase/matriz.
2. P4/ovulación, fuente y PK explicarán más varianza sanguínea que el fenotipo clínico.
3. Sangre tendrá concordancia insuficiente o sesgada con LCR en parte de las mujeres.
4. El bloque neuroesteroideo no mejorará de forma material predicción leave-one-cycle-out sobre P4/E2, función previa y variables temporales.
5. Cualquier señal residual será específica de circuito/etapa y no transportará a healthspan.

Evidencia a favor: nulos PMDD/periparto, PHASE, discrepancias RIA–MS, razón folicular–posmenopáusica conservada y falta de pares sangre–SNC.
Evidencia contra: dutasterida, addback, brexanolona y modelos receptores demuestran perturbabilidad en contextos seleccionados.

Kill criteria: flujo o respuesta central reproducible precede la función, persiste tras confundidores previos y replica; o una perturbación específica cambia la función con exposición/sustrato equivalentes.

Rivales auxiliares que deben medirse dentro del mismo programa:

• L7-2-AR-H1C v1: cloruro/maduración explica la aparente histéresis; prioridad como control, no como explicación humana completa.
• L7-2-AR-H2 v2: un microcircuito metabólico local cambia Allo/ISO y la función; debilitado hasta demostrar catálisis, balance y bypass.

12. Hipótesis traslacional: L7-2-AR-HT1 v2

Rol: hipótesis metrológica/traslacional condicional.
Estado: parked; HUMAN_QA_REQUIRED.
Confianza: 0.02.
Madurez: H0; no elegible para H5.

Enunciado falseable: sólo después de validar causalidad y metrología por separado, un parámetro de exposición con concordancia central y un parámetro de respuesta GABA_A mejorarán error y calibración externos para una única función neurofisiológica proximal respecto a fase, ovulación, P4/E2 AUC, sueño basal y función previa.

Predicciones: cada componente supera estabilidad, LLOQ, ICC/CCC/CV y especificidad antes de combinarse; el modelo de dos parámetros mejora validación leave-one-cycle-out y réplica externa; la ganancia persiste tras comparadores simples; no necesita síntomas contemporáneos ni un panel post hoc.

Evidencia a favor: los dos filtros son mecanísticamente distintos y las concentraciones aisladas fallan repetidamente.
Evidencia contra: no existe ensayo estandarizado, puente central, confiabilidad test–retest ni validación externa; alto riesgo de sobreajuste y fuga por fase.

Kill criteria: falla cualquier componente, concordancia plasma–LCR insuficiente, ausencia de ganancia externa, inestabilidad por fase/lote, necesidad de más de dos componentes o fracaso del mecanismo causal correspondiente.

13. Predicciones falseables y criterios de eliminación

Los criterios anteriores son de decisión. Un nulo válido se conserva y detiene la expansión; no se rescata añadiendo variables, subgrupos o endpoints después de abrir los datos.

14. Experimento discriminante

14.1 Secuencia mínima

Q0 metrología → Q1 cloruro/madurez
      └────────→ D0A-0 catálisis → D0A-1 flujo/bypass
Q1 positivo ─────────────────────→ D0C trayectoria/receptor
D0 funcional positivo → D1X plasma–LCR → D1 dos ciclos

14.2 Q0 — metrología

Validar LC-MS/MS en buffer, célula/medio, plasma y LCR. Separar P4, 5α/5β-DHP, Allo, ISO, pregnanolona, epipregnanolona, productos 20α, conjugados y trazadores. Seis corridas en ≥3 días y dos operadores. Gates: sesgo/imprecisión ≤15% en QC y ≤20% en LLOQ; contribución del isómero vecino <10%; balance de spike 80–120% y ≥70% del label explicado en biología o registrado como flujo parcial. Si falla, sólo se permiten perfiles, no flujo.

14.3 Q1 — modelo neural

Seis fondos iPSC femeninos no relacionados, tres diferenciaciones por fondo. Requisito: al menos cinco fondos y dos diferenciaciones por fondo con E_GABA ≥10 mV más negativo que reposo, test–retest ±5 mV, farmacología GABA_A, KCC2/NKCC1 funcionales, madurez de disparo/red, respuesta aguda a Allo y receptor superficial ensamblado con una subunidad β. Gramicidina/perforated patch es obligatoria. Si falla, se cambia el modelo y D0C no se interpreta.

14.4 D0A-0/D0A-1 — metabolismo

Pantalla ciega con 5α-DHP marcada, AKR1C2 como positivo, AKR1C1/3, HSD17B6 y SDR verificables como rivales; HSD17B10 sólo en sistema catalítico o separación de función. Un máximo de un formador y un oxidante/epimerasa avanza si su IC90 supera blanco, alcanza ≥10% de AKR1C2 o produce un producto cualitativamente distinto en ≥5/6 corridas y replica en una corrida retenida.

En célula, comparar monocultivo neuronal con cocultivo astrocito–neurona, reducción parcial 40–70%, rescate y control no targeting. Pulso P4 marcada, bypass 5α-DHP y bypass Allo/ISO. Unidad biológica: 18 diferenciaciones (6×3). SESOI_flujo=max(20%,3×CV analítico). Exigir dirección en ≥5/6 fondos. Metabolito sin efecto funcional mata la extensión neural.

14.5 D0C — trayectoria/receptor

En placas independientes, estimar fosforilación y superficie a 0, 0.5, 2, 6, 24 y 48 h y congelar un modelo de una o dos escalas antes del endpoint. Administrar trayectoria lenta, retirada rápida y waveform oscilatoria retenida con Allo libre, pico, AUC y tiempo sobre umbral equivalentes dentro de ±10%. Seleccionar un solo nodo receptor y comparar intacto, reducción parcial y rescate.

Primario: ganancia inhibitoria por perforated current clamp con E_GABA ±5 mV del basal. SESOI_función=max(15%,2×CV test–retest). Modelo jerárquico por fondo/diferenciación; TOST con IC90 para equivalencia. La waveform retenida se evalúa una vez, sin reajuste.

14.6 D1X/D1 — puente humano condicionado

D1X: 50 mujeres de 35–55 años ya programadas para un procedimiento con acceso clínico a LCR; no se realiza punción sólo por investigación. Plasma y LCR dentro de 15 minutos, antes de anestésico intratecal. Primario: CCC absoluta de Allo. El no-go cierra sangre como proxy central, no la biología cerebral.

D1: sólo tras mecanismo funcional y puente de compartimento. Sesenta mujeres sin selección por síntomas, 30 reproductiva tardía y 30 perimenopausia temprana, dos ciclos. Seis muestras por ciclo y TMS/SICI en folicular, lútea media y retirada. Un único endpoint primario; modelos sistémico, +trayectoria y +respuesta, validados leave-one-cycle-out. No está potenciado para interacción por etapa. Un positivo demuestra asociación humana proximal, no healthspan ni causalidad definitiva.

15. Medidas candidatas y estratificación

No existe un biomarcador validado. Las siguientes son medidas candidatas de investigación:

La estratificación humana debe ser por etapa/ovulación, ciclo ovulatorio/anovulatorio, fase/pendiente, método/matriz, medicación hormonal y función hepática/renal. PMDD, PTSD, puerperio y AD no son estratos intercambiables. GABRD en PBMC es un proxy experimental y no debe sustituir receptor cerebral.

16. Variabilidad individual

La variabilidad puede surgir en al menos diez niveles:

1. Arquitectura ovulatoria: probabilidad de ovulación, masa/duración lútea y retirada de P4.
2. Fuente: ovario, adrenal, periferia o síntesis neural local.
3. Isoforma 5α: SRD5A1/2 por célula/región, todavía sin fenotipo funcional femenino replicado.
4. Partición downstream: formación, back-oxidación, epimerización a ISO y desvíos 20α.
5. Cofactores/redox: pueden cambiar dirección neta, sin evidencia humana in vivo suficiente.
6. Transporte/conjugación/depuración: alteran sangre y medio sin cambiar flujo local.
7. Compartimento: igual sangre puede coexistir con distinta exposición neural.
8. Receptor: subunidades, ensamblaje, superficie y fosforilación.
9. Cloruro/red: KCC2/NKCC1, GABA ambiental, relación E/I y circuito.
10. Historia temporal y metrología: exposición previa, frecuencia, fase mal fechada, matriz, lote y LLOQ.

Una diferencia sólo será «individual» si es reproducible dentro de mujer/fondo y mayor que la variación analítica y de fase. Genotipo, RNA o una muestra aislada no bastan. Seis fondos experimentales permiten detectar mecanismos grandes y consistencia, no prevalencia poblacional.

La etapa vital modifica la distribución de estas fuentes: en ciclo ovulatorio domina fase; en perimenopausia probablemente aumenta la irregularidad; en postmenopausia cambian sustrato y fuentes; en puerperio domina una retirada extrema; en AD cambian composición tisular y patología. Compartir un metabolito no implica compartir mecanismo.

17. Relevancia Pharma y madurez

La relevancia farmacológica es condicional y se limita a hipótesis de investigación:

Un D0A positivo produciría un target de flujo y un assay de target engagement, no un fármaco. Un D0C positivo produciría una regla experimental de régimen, no eficacia clínica. Un D1 positivo identificaría una señal fisiológica proximal, no una indicación. Todos requieren evaluación humana experta; no existe readiness de seguridad, eficacia, companion diagnostic o partnering.

No-go Pharma: efecto sólo periférico; perturbación pleiotrópica; resultado dependiente de cloruro inmaduro; falta de balance esteroideómico; beneficio inferido desde síntomas; o exposición continua sin ventana de seguridad. HUMAN_QA_REQUIRED permanece activo.

18. Limitaciones

1. No existe flujo cerebral P4→5α-DHP→Allo longitudinal en mujeres vivas.
2. No existe puente cuantitativo sangre–LCR/cerebro validado en mujeres objetivo; LCR tampoco equivale a sinapsis.
3. El tejido humano cerebral procede de epilepsia o post mortem.
4. PMDD domina la evidencia dinámica humana, pero no transporta automáticamente a perimenopausia.
5. Muestras humanas mecanísticas son pequeñas; varios estudios tienen n de 8–30 y no fueron de equivalencia.
6. Dutasterida afecta múltiples esteroides 5α; P4 genera múltiples metabolitos; sepranolona modifica respuesta y no formación.
7. RIA, MS, suero/plasma y mezcla de epímeros generan heterogeneidad material.
8. TMS, MRS, fMRI y PBMC son lecturas indirectas y específicas de circuito/tejido.
9. El atlas computacional mezcla plataformas/regiones, usa edad y no etapa, y carece de réplica SEA-AD ejecutada.
10. RNA no es proteína, ensamblaje, cofactor, dirección ni actividad.
11. iPSC puede borrar edad/historia hormonal y mantener GABA despolarizante.
12. HSD17B10 y otros candidatos tienen funciones pleiotrópicas que dificultan atribución.
13. Estudios animales difieren por especie, régimen, edad, sexo y modelo; algunos resultados de AD usan machos.
14. Allo cortical baja en AD es transversal y compatible con causalidad inversa.
15. Los SESOI y gates experimentales son operacionales y deben congelarse sin mirar contrastes biológicos.
16. No se ha evaluado healthspan ni longevidad; un seguimiento de ciclos o 12 meses no lo haría.

19. Conclusiones

La ruta 5α es necesaria para formar Allo desde P4, pero no está demostrado que una deficiencia individual de 5α-reductasa explique la variabilidad neurológica femenina. La literatura humana sostiene capacidad local, dependencia de fase y perturbabilidad; simultáneamente rechaza una deficiencia periférica uniforme como modelo general. La hipótesis humana mejor respaldada hoy es epistémica: sangre, fase, P4, fuente, PK y método impiden identificar el mecanismo central.

La mejor hipótesis experimental es más específica: una trayectoria neuroesteroidea puede rebasar la adaptación receptora y cambiar la ganancia inhibitoria a exposición igual. Su principal amenaza es biofísica —cloruro y maduración— y debe medirse antes de atribuir histéresis. Su rival metabólico sólo sobrevive si un trazador, balance, pérdida–rescate y doble bypass localizan la partición 5α/3α/ISO y conectan metabolito con función.

El orden de validación importa: estereoquímica → cloruro/madurez → catálisis/flujo → consecuencia funcional → trayectoria/receptor → compartimento humano → serie intraindividual. Saltar directamente a una cohorte sanguínea o a un ensayo farmacológico repetiría la ambigüedad existente.

Para salud y longevidad, el resultado es deliberadamente negativo y productivo: no hay evidencia de que aumentar o disminuir Allo mejore longevidad femenina. La asociación con AD no establece causa y la preclínica no muestra un signo uniforme. El puente sólo podrá abrirse si un mecanismo precede una función específica durante años y después se conecta con años libres de enfermedad, conservando recuperación, órgano, sexo, etapa y competing risks.

Afirmaciones añadidas por el informe

• L7-2-REPORT-ES-C1: el modelo final requiere cuatro dimensiones separadas —flujo, trayectoria, adaptación receptora y cloruro—; omitir cualquiera vuelve no identificable el signo funcional.
• L7-2-REPORT-ES-C2: los datos humanos actuales favorecen una nulidad epistémica periférica, no equivalencia central; la prueba decisiva debe comenzar con metrología y modelo celular, no con una cohorte sanguínea mayor.
• L7-2-REPORT-ES-C3: el ranking transcriptómico prioriza dónde medir, pero la catálisis downstream se adjudicará sólo por producto marcado, balance, pérdida–rescate y bypass.
• L7-2-REPORT-ES-C4: la extensión a healthspan y Pharma permanece cerrada hasta demostrar función proximal causal, concordancia de compartimento y réplica externa.

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